叠10叠搁小鼠永生化黑素细胞复苏/冻存-糖心官网vlog

叠10叠搁小鼠永生化黑素细胞

产物介绍
叠10叠搁小鼠永生化黑素细胞Complete Growth Medium : 89%1640+10%FBS+1%双抗

产物型号：复苏/冻存

更新时间：2024-07-09

厂商性质：生产厂家

访问量：610

产物咨询 15021281375

产物分类

PRODUCT CLASSIFICATION

科研细胞

细胞系原代细胞

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叠10叠搁小鼠永生化黑素细胞

Product Format : a T25 flask

Culture Properties ：贴壁

Complete Growth Medium : 89%1640+10%FBS+1%双抗

Atmosphere : air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

Application : Cells and cancer research

NOTE : FOR RESEARCH USE ONLY

细胞培养操作步骤：

1. 吸走多余培养基，加入3-5mL PBS后轻轻晃动培养瓶润洗细胞；

2. 吸干净PBS后

加入1mL 0.25%胰-酶-0.53mM EDTA，轻轻摇晃培养皿使胰-酶浸没细胞表面，培养瓶放37度培养箱消化；

（细胞对于消化比较敏感，消化过度会严重影响细胞状态，导致细胞传代死亡漂浮或者传代后不长。细胞消化到细胞间隙变大但未脱落，可以轻轻吹下时即可终止，禁止消化到细胞*漂浮。混匀细胞时尽量轻柔，不要吹出大量气泡。）

3. 加入6-8ml*培养基终止消化，轻轻吹下细胞混匀；

4. 将混匀的细胞1000rpm（约150g）离心3min，弃上清，再用新鲜培养基重悬37度培养箱继续培养；

传代比例: 不同细胞生长速度不一，具体传代比例视细胞生长速度而定，大部分细胞适用1:3-1:4传代，生长较慢的细胞可以1:2传代。

Cell cryopreservation

1.冻存液：92%*培养基+8%顿惭厂翱（可以根据实验室条件自行选择）

2.降温步骤：4度10尘颈苍，-20度2丑，-80过夜后液氮保存。

Tips

1. 细胞经过运输后，部分细胞由于温度变化及剧烈撞击死亡破碎形成碎片，是正常现象。贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900-1000rpm(约150g)离心3min，弃上清。加5ml PBS重悬细胞，再900-1000rpm(约150g)离心3min，用新鲜的wan全培养基重悬接种到新的培养瓶。第二次PBS重悬是为了去除碎片，如果平时碎片比较少，传代时可以省略PBS重悬的步骤；如果碎片很多，建议PBS多洗几次。

2. 细胞生长不均时，可以将细胞消化吹散后加入新的培养基重新接种或传代。

3.细胞生长缓慢时，可以选择提高血清浓度培养（最高不超过20%），也可以根据细胞生长状态，选择传代细胞到新的培养瓶中继续培养。

4. 不同细胞贴壁性差异比较大，所以消化时间差别较大，20s-10min均有可能，具体以细胞消化到相互分离但未脱落，并可以轻轻吹下为准，严禁消化到细胞wan全漂浮。客户消化过度导致细胞死亡、漂浮、生长缓慢，不提供免费售后服务。

5. 干冰发货均为两支，客户先复苏一支，若复苏失败及时联系我方并在我方指导下复苏第二支。若客户同时复苏两支均状态不佳，我方不提供免费售后服务。

6. 细胞状态正常时，应尽快冻存细胞保种，冻存后应随机抽取一支检测冻存效果。我方不对客户冻存细胞导致死亡负责，客户冻存细胞死亡不提供免费售后服务。

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